淋球菌性腹膜炎
病因
继发感染(65%):
淋球菌性腹膜炎多继发于患者自身其他部位的淋球菌感染,如急性盆腔腹膜炎,大多数继发急性淋球菌性输卵管炎,输卵管渗出物经伞端流入腹腔,引起局限性盆腔的炎症;急件原发性淋菌件腹膜炎,是由阴道淋菌播散引起;急性弥散性腹膜炎,则由于输卵管淋球菌积脓,卵巢淋球菌脓肿或盆腔淋球菌脓肿破裂而引起。
原发感染(35%):
淋球菌性腹膜炎的病原体为淋病双球菌,系1879年奈瑟氏所发现,故又名奈瑟淋病双球菌(Neisseria gonorrhoeae) 呈卵圆形或肾形,成对排列,其大小0.6~0.8µm,一股存于多形核白细胞的胞浆内,革兰染色阴性;普通培养基上不生长,可在3%~10%CO2条件下用巧克力血液琼脂培养基或含有万古霉素,黏菌素及制霉菌素的Thayer-Martln培养基方能生长。
发病机制
人类是淋球菌的惟一天然宿主,主要侵袭黏膜组织,并引起局部炎症性反应:广泛充血,水肿,浆液性渗出,继而化脓,结缔组织增生。
淋球菌感染机体涉及不同的阶段,包括黏附,侵入,细胞内生存及诱导宿主反应等,体外组织及器官培养研究表明,淋球菌通过多种黏附素黏附于非纤毛上皮细胞,通过一种涉及肌动生蛋白微丝和微管的内在化作用(internalization)进入上皮细胞,经穿胞(transcytosis)和胞吐(exocytosis)通过基底层进入上皮下层,淋球菌通常定居上皮下层,诱发炎症反应,偶尔细菌进入血流引起播散性感染,在感染及传播过程中淋球菌需适应宿主环境,逃避宿主的防御机能,淋球菌适应及免疫逃避的机制包括表面成分的抗原变异,利用宿主成分,以及抵抗不利环境及吞噬细胞的攻击。
淋球菌的主要毒力因子包括:
1.菌毛 具有相和抗原变异的能力,菌毛参与淋球菌的黏附及侵入,并为宿主免疫防御的靶目标。
2.孔蛋白(PorB) 在淋球菌侵入,细胞内存活,血清抗性及抗生素敏感性中具重要作用。
3.不透明蛋白(Opa) 介导对几种不同真核细胞的黏附与侵入。
4.Rmp蛋白 有很强的免疫原性,其抗体可阻断正常及免疫血清对淋球菌的杀伤作用,在播散性淋球菌感染中具重要意义,Rmp还参与淋球菌侵入上皮细胞。
5.脂寡糖(Los) 除参与各种生理性膜功能外,影响细菌的黏附与侵入,诱导炎症反应以及抵抗宿土的防御。
6.IgAl蛋白酶 淋球菌分泌的一种细菌外肽链内切酶,以人血清型及分泌型IgAl为底物,最近研究表明,IgA2蛋白酶对淋球菌在细胞内存活上十分重要。
症状
1.下腹痛单侧或两侧下腹部疼痛,少数为转移性下腹部疼痛,但较其他腹膜炎轻,常尿频,尿急,尿痛,尿道灼痛,既往在半年内常有类似症状,有不洁性接触病史。
检查
1.外周血象 白细胞计数>15×109/L,中性粒细胞增多。
2.细菌学检查
(1)分泌物镜检:
①尿道(男性)或阴道分泌物镜检:可有大量红色多形核白细胞,在有些细胞中吞噬有淋球菌,淋球菌为革兰阴性,呈卵圆形或圆形,常成双排列,两菌接触面扁平或稍凹,菌体长约0.7µm,宽约0.5µm,但两菌大小可有差异,多数多形核白细胞中并不含淋球菌,但不少白细胞中常含有1对至数对,甚至数十对淋球菌,淋球菌常位于细胞质内。
病期较长或经过治疗的淋病患者,其分泌物涂片中淋球菌数目较少,有时呈单个,四联和八叠状,且常位于细胞外。
尿道分泌物标本制作法:用浸有灭菌等渗盐水的拭子揩洗尿道口,然后用手指由后向前挤出脓液,用棉拭子蘸取脓液后轻轻涂布于载玻片上,待自然干燥后加热固定,染色(常用革兰染色,也可用亚甲蓝染色),镜检。
②腹腔分泌物检查:腹腔穿刺抽液,脓液呈黄白色,稀薄,量少,无臭味,涂片可找到淋病双球菌或PCR球菌,DNA检查阳性。
③注意事项:
A.淋病的诊断标准是可见“细胞内革兰阴性双球菌”,故涂片宜动作轻柔,且棉拭子不得在玻片上滚动,以防止细胞破裂或变形,细菌从细胞内逸出,造成诊断上的混淆。
B.涂片薄厚适当,涂片过厚易造成脱色时间不足,使革兰阴性菌也呈现紫色,大量染片时,最好用已知的革兰阳性菌(如葡萄球菌)和阴性菌(如大肠埃希菌)作对比观察。
C.固定涂片时,只需迅速通过火焰2~3次即可,避免加热过度致细胞变形,一般涂片至手背之上以不感到太烫为宜。
(2)淋球菌培养:淋球菌培养是WHO推荐的淋病筛查的惟一方法,也是诊断的“金标准”。
常用血液琼脂或巧克力琼脂培养基培养,为抑制杂菌,可加入适量抗菌物质,如多黏菌素B(25µg/ml)和万古霉素(3.3µg/ml)等。
淋球菌在血平皿上经24~48h的培养后,可形成圆形,凸起,湿润,光滑,半透明或灰白色菌落,边缘呈花瓣状,直径为0.5~1.0mm,用接种环触之有黏性,如继续培养,菌落面积增大,表面变得粗糙,边缘出现皱缩,若从菌落上取材作涂片,可见到菌的大小及染色的深度有差异,排列也不一致,约有25%的菌为典型的双球菌,其他75%为单球菌,四联形或八叠形。
使用液体培养基时,淋球菌生长于液体表面,稍有轻度混浊和颗粒沉淀。
培养标本采集和送检中应注意:
①深部取材:从男性尿道取材时,应将细小棉拭子伸入到尿道内2~4cm处,取出带有黏膜细胞的分泌物,从女性宫颈取材时,应先用温水湿润扩阴器(不要用液体石蜡等润滑油),然后将棉拭子插入宫颈管1.0~1.5cm,转动并停留10~30s,有时为了提高阳性率,可同时取2份标本进行培养,但工作量也相应增加。
②及时送检,接种:淋球菌对环境变化敏感,耐寒,耐干的能力弱,因此,标本离体后要立即送检,若实验室较远,可将标本接种于Stuart或Amies运送培养基或浸入1%葡萄糖肉液浸中,途中保温。
(3)氧化酶试验:是淋球菌重要的初步诊断试验之一,淋球菌在生长过程中能产生氧化酶,在经24~48h培养的菌落上滴加氧化酶试剂(0.5%~1%盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四甲基对苯二胺水溶液),其菌落变成紫红乃至黑色者为阳性反应,但氧化酶试验阳性者并不完全是淋球菌。
为保证氧化酶试验结果的准确性,操作中应注意3个问题:
①氧化酶试剂要新鲜:正常的氧化酶试剂(盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四甲基对苯二胺)为淡红色,若试剂变成灰色或黑色,说明已经失效,配制的试剂溶液需放在棕色玻璃瓶中避光保存,有效使用时间约1周。
②避免使用铁质接种环:氧化酶试剂与铁离子接触会产生红色的化学变化,造成“阳性”假象,故淋球菌接种应避免使用旧铁丝或电炉丝等制成的接种环,试验前亦应检查接种环与试剂接触是否有红色出现。
③需要保留菌种时,应在菌落尚未完全变黑时挑出少许转种,菌落一旦变黑,多数细菌即告死亡。
(4)过氧化氢酶试验:淋球菌可产生过氧化氢酶,该酶能使过氧化氢迅速分解成水和氧气,出现气泡,用作淋球菌的初步鉴定。
①方法:用接种环挑取一菌落置于干净载玻片上,取30%(V/V)过氧化氢溶液1滴加于可疑菌落表面,在1s内有大量气泡产生,为阳性反应,如反应迟缓或产生气泡弱为阴性反应。
②注意:某些非致病的奈瑟菌亦可为阳性反应,阴性反应可除外淋球菌。
(5)直接免疫荧光试验:将荧光素标记的淋球菌抗血清(单克隆抗体)滴于可疑菌上,遇到淋球菌(抗原)时,抗体与抗原结合,在荧光显微镜下可见到发苹果绿色荧光的菌体,本法检测快速,死菌亦可有阳性反应。
诊断
1.病史 身体其他部位有明确的淋球菌感染史,或有不洁性交史,或配偶有淋球菌感染史,或患儿父母有淋球菌感染史,或与家中淋病患者共用物品史等。
2.临床表现 有泌尿或生殖器官的感染症状,如尿道口红肿,脓性分泌物(或脓性白带);有尿频,尿急,尿痛等膀胱刺激征,有腹痛,腹部压痛,反跳痛,肌紧张等腹膜刺激征;全身不适等。
并发症
治疗
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